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人血管組織提取物說明書

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人血管組織提取物說明書 詳細資料

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人血管組織提取物說明書	Vascular: Normal Human Vascular Derivatives	來電可享受優(yōu)惠

人血管組織提取物【Vascular: Normal Human Vascular Derivatives】
人血管組織提取物說明書血管壁分為內膜、中膜、外膜。內膜由內皮和內皮下層組成；中膜由彈性膜組成；外膜由疏松結締組織構成。公司科技提供來自新鮮或冷凍人血管組織中高質量的總RNA，PCR準備的*條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA*鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA， μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證產品的質量。蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。潛在的應用： <>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。
培養(yǎng)步驟：
人血管組織提取物說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

兔抗ZBTB0 ?多克隆抗體英文名：Anti-ZBTB0(TM) rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗ZBTB ?多克隆抗體英文名：Anti-ZBTB(TM) rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗ZBTB2 ?多克隆抗體英文名：Anti-ZBTB2(TM) rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗ZBTB26 ?多克隆抗體英文名：Anti-ZBTB26(TM) rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗ZBTB3 ?多克隆抗體英文名：Anti-ZBTB3(TM) rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗ZBTB6 ?多克隆抗體英文名：Anti-ZBTB6(TM) rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

人血管組織提取物說明書Sodium cholate 膽酸鈉 36-09- 00mg

G-48 Sulfate 遺傳霉素 g 支

Cycleanine 輪環(huán)藤堿 58-94-5 20mg

Glucose oxidase 葡萄糖氧化酶 0ku 瓶

Artesunate 琥酯 88495-63-0 20mg

4-Hydroxyphenylacetic acid 對羥基乙酸 56-38-7 20mg

Maconkey Agar 麥康凱瓊脂 250g 瓶

Epmedin C 朝藿定C 0642-44-9 20mg

Carbenicillin Disodium Salt 羧芐 g 瓶

0.6ml離心管，0盒/箱 000支盒

Itraconazole 84625-6-6 00mg

注意事項：
. 接收到人血管組織提取物說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

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