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技術(shù)文章

PCR檢測(cè)試劑盒的具體使用步驟您都了解嗎?
點(diǎn)擊次數(shù):751 更新時(shí)間:2021-11-25
  PCR檢測(cè)試劑盒中含有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)所需要各種試劑組分,如:引物、dNTPs、緩沖液、Taq酶等,PCR反應(yīng)液混合液中加入檢測(cè)樣品,即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷,陽(yáng)性樣本將在相應(yīng)大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。
 
  PCR檢測(cè)試劑盒的具體使用步驟:
 
  一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
 
  磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
 
  二、實(shí)驗(yàn)步驟
 
  .滴加0.0mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
 
  2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
 
  3.取出玻片,置玻片架上,先用0.0mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.0mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
 
  4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
 
  5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
 
  PCR檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn):
 
  準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
 
  2高靈敏:可檢測(cè)低至0ng的人基因組DNA。
 
  3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
 
  4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
 
  5防污染
 
  6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。

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