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技術(shù)文章

哪些原因會導(dǎo)致Elisa試劑盒溢值?
點(diǎn)擊次數(shù):709 更新時間:2020-12-22
  Elisa試劑盒適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,Elisa試劑盒試驗(yàn)過程繁瑣,為什么ELISA會出現(xiàn)“溢值”的現(xiàn)象呢,下面我們來仔細(xì)說說。
 
  ① 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋。
 
  ② 孵育時刻/溫度不正確。
 
  ③ ELISA試劑盒在孵育時為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物:在孵育時需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物,以避免液體蒸騰或孵育期間的污染。每個試劑盒內(nèi)均有滿足數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物。
 
  ④ 檢測波長不正確:要確保分光光度劑的檢測波長是正確的。
 
  ⑤ TMB底物的顯色時刻過長:請監(jiān)控顯色時刻。闡明書中所示的顯色時刻或許因?yàn)闇囟群推渌鼨z測條件的不同而稍有變化。
 
  ⑥ 樣品不適合此檢測:在闡明書中會列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍,超出范圍的標(biāo)本或許不適于此試劑盒或者檢測條件需要探索。
 
  ⑦ 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品污染:樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的污染或許會導(dǎo)致檢測成果“溢值”。
 
  ⑧ 巧合試劑不正確稀釋:要嚴(yán)厲依照說明書來稀釋巧合試劑,濃度過高會形成OD的“溢值”HRP巧合試劑的不正確稀釋
 
  ⑨ 所用稀釋液不對: ELISA試劑盒只能運(yùn)用相應(yīng)試劑盒內(nèi)的稀釋液稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
 
  ELISA試劑盒的*優(yōu)勢如下:
 
  、參與反應(yīng)的化酪胺總量與微孔中HRP的量成比例。
 
  2、經(jīng)孵育后,未結(jié)合的化酪胺通過洗滌去除。
 
  3、洗滌去除未反應(yīng)的化酪胺后,加入信號擴(kuò)增試劑II與復(fù)合物的多個位點(diǎn)結(jié)合,此放大步驟可有效增加zui終參與催化TMB底物的HRP分子數(shù)量。

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