操作人員使用Elisa試劑盒前的操作須知介紹
點擊次數:510 更新時間:2022-06-27
Elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA),往預先包被GSH捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌,用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成較終的黃色,顏色的深淺和樣品中的GSH呈正相關,用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
Elisa試劑盒的操作須知:
1.分析前質控
① 特色 :在固相外表組裝免疫活性物質形成“免疫吸附劑”;
② 酶標記免疫活性物質,進行信號擴大;
③ 有二步溫育反應二次洗滌過程;
④ 靈敏度特異性相對較高;
⑤ 局限性:只能檢測到ng;
⑥ 精密度差(批內CV15-20%);
⑦ 線性規模窄(一個數量級);
⑧ 存在"HD-HOOK"效應。
2.試驗檢測人員需經過培訓,把握這幾方面的技術知識:
① 檢驗項目的基本原理;
② 臨床意義;
③ 熟悉檢測技巧,了解易出差錯的環節及難點;
④ 熟悉檢測試劑功能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);
⑤ 熟悉檢測儀器的原理及功能;
⑥ 把握數據處理的能力和質量操控知識;
⑦ 某些特別項目的檢測如抗HIV等需經有關部門組織的專門培訓班,考試合格后持證上崗。